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一步法逆转录-荧光定量快速检测试剂盒高品质原料
价格: 850.00
运费 ¥0.00
R1031 /100次(20 µl反应体系)

RT -PCR Mix for qPCR 预混型 逆转录试剂盒)

货号: R1031 规格: 100 次( 20 µ l 反应体系)

产品说明

RT-PCR Mix for qPCR 是预混型逆转录反应试剂盒,操作简便,可快速高效完成逆转录反应。其中 Enzyme Mix 含有高效逆转录酶和热敏型 DNase ,一步完成基因组 DNA 的清除以及 RNA 的逆转录反应, RT Buffer 包含逆转录反应所需的其他组分,无需分步多次加样,降低了样品污染的风险。同时,本试剂盒配备了 Control Mix ,用于阴性对照反应,检验 RNA 模板中是否有基因组 DNA 残留。本试剂盒的逆转录产物对染料法和探针法荧光定量 PCR 反应均有很好的兼容性,可进行精准的基因表达分析

产品组分

组分

R10 3 1 10 0

Enzyme Mix

10 0 μl

5X RT Buffer

400  μl

Control Mix

20 μl

RNase-free ddH 2 O

1 ml × 2

保存条件

各组分均 -20 ℃保存,并避免反复冻融。

适用范围

第一链 cDNA 合成

注意事项

l 本品含有热敏型 DNase ,请于冰上使用本品各组分。

l 为保证成分均匀,请将 Enzyme Mix 5X RT Buffer Control Mix 分别瞬时离心、吹打混匀后再吸取使用。

l 在操作过程中,注意防止 引入 RNase 导致 RNA 降解 RNA 最好保存于 -70℃ ,避免反复冻融。

l cDNA产物应置于 -20℃ 或以下 保存 避免反复冻融

操作步骤

1 . 配制反应体系

按以下体系,在冰浴的无菌无酶离心管中配制反应混合液:

组分

用量

5X RT Buffer

4  μl

Enzyme Mix

1  μl

RNA

1pg-1 µ g

RNase-free ddH 2 O

补足至 20  μl

阴性对照反应(可选)

即不加逆转录酶的反应,产物用于在 qPCR 中作为阴性对照,检验模板 RNA 中是否有基因组 DNA 残留

按以下体系,在冰浴的无菌无酶离心管中配制反应混合液:

组分

用量

5X RT Buffer

4  μl

Control Mix

1  μl

RNA

1pg-1 µ g

RNase-free ddH 2 O

补足至 20  μl

2. 进行逆转录反应

将上述混合液吹打混匀,瞬时离心收集至管底。按以下程序,在 PCR 仪中进行反应:

温度

时间

50

15 min

85

5 sec

3. qPCR 反应及 cDNA 保存

cDNA 产物可稀释后立即进行染料法或探针法 qPCR 反应。若使用未稀释的 cDNA 原液,则体积不能超过反应体系的 1/10 ,以避免抑制反应效率。长期保存 cDNA 产物应于 -20℃ 或以下环境中 并避免反复冻融


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